Krążki bibułowe o średnicy 9 mm nasycone chlorkiem sodu i chlorkiem 2,3,5 trójfenylotetrazoliny, do różnicowania szczepów Enterococcus faecalis i Enterococcus faecium.
Sposób postępowania
do identyfikacji należy zastosować wystandaryzowane zgodnie z zaleceniami NCCLS podłoże Mueller – Hinton II Agar
doprowadzić płytki do temperatury pokojowej
hodowlę czystego szczepu paciorkowca lub pojedynczą kolonię, pochodzącą bezpośrednio z izolacji wysianego wcześniej materiału diagnostycznego, posiać ezą wąskim zygzakiem lub paskiem o szerokości nie większej niż 0,5 cm na w/w podłoże
na środek linii posiewu nałożyć krążek diagnostyczny EF
na jednej szalce Petriego o średnicy 9 cm można identyfikować do 6 szczepów wysianych promieniście
płytki z nałożonymi krążkami należy preinkubować przez 15 minut w temperaturze pokojowej
hodowlę inkubować 18-24 godzin, w temperaturze 35° C, w atmosferze tlenowej
Interpretacja wyników
Enterococcus faecalis- badany szczep wykazuje wzrost na całej lini posiewu oraz charakterystyczne zabarwienie od koloru różowego do ciemno bordowego zarówno na linii posiewu jak i pod krążkiem. Natężenie barwy może być nierównomierne.
Enterococcus faecium- badany szczep wykazuje równomierny wzrost na całej linii posiewu przy równoczesnym braku zabarwienia
szczepy paciorkowców wykazujące każdej wielkości strefę zahamowania wzrostu wokół krążka, niezależnie od zabarwienia nie należą do rodzaju Enterococcus.
równocześnie z identyfikacją szczepów badanych powinna być przeprowadzona kontrola wobec szczepów wzorcowych w celu potwierdzenia i porównania deklarowanego wzrostu i nasilenia zabarwienia.
Enterococcus faecalis
ATCC 29212
wzrost na całej lini posiewu oraz charakterystyczne zabarwienie od koloru różowego do ciemno bordowego zarówno na linii posiewu jak i pod krążkiem
Enterococcus faecium
ATCC 27270
równomierny wzrost na całej linii posiewu przy równoczesnym braku zabarwienia
Streptococcus bovis
ATCC 49475
zahamowanie wzrostu na lini posiewu wokół krążka
Produkt przeznaczony do diagnostyki „in vitro”. Opakowanie zawiera 30 krążków.
Przechowywać w szczelnie zamkniętych fiolkach o temperaturze 2-10C do upłynięcia daty ważności podanej na opakowaniu.